Банк рефератов содержит более 364 тысяч рефератов, курсовых и дипломных работ, шпаргалок и докладов по различным дисциплинам: истории, психологии, экономике, менеджменту, философии, праву, экологии. А также изложения, сочинения по литературе, отчеты по практике, топики по английскому.
Полнотекстовый поиск
Всего работ:
364150
Теги названий
Разделы
Авиация и космонавтика (304)
Административное право (123)
Арбитражный процесс (23)
Архитектура (113)
Астрология (4)
Астрономия (4814)
Банковское дело (5227)
Безопасность жизнедеятельности (2616)
Биографии (3423)
Биология (4214)
Биология и химия (1518)
Биржевое дело (68)
Ботаника и сельское хоз-во (2836)
Бухгалтерский учет и аудит (8269)
Валютные отношения (50)
Ветеринария (50)
Военная кафедра (762)
ГДЗ (2)
География (5275)
Геодезия (30)
Геология (1222)
Геополитика (43)
Государство и право (20403)
Гражданское право и процесс (465)
Делопроизводство (19)
Деньги и кредит (108)
ЕГЭ (173)
Естествознание (96)
Журналистика (899)
ЗНО (54)
Зоология (34)
Издательское дело и полиграфия (476)
Инвестиции (106)
Иностранный язык (62792)
Информатика (3562)
Информатика, программирование (6444)
Исторические личности (2165)
История (21320)
История техники (766)
Кибернетика (64)
Коммуникации и связь (3145)
Компьютерные науки (60)
Косметология (17)
Краеведение и этнография (588)
Краткое содержание произведений (1000)
Криминалистика (106)
Криминология (48)
Криптология (3)
Кулинария (1167)
Культура и искусство (8485)
Культурология (537)
Литература : зарубежная (2044)
Литература и русский язык (11657)
Логика (532)
Логистика (21)
Маркетинг (7985)
Математика (3721)
Медицина, здоровье (10549)
Медицинские науки (88)
Международное публичное право (58)
Международное частное право (36)
Международные отношения (2257)
Менеджмент (12491)
Металлургия (91)
Москвоведение (797)
Музыка (1338)
Муниципальное право (24)
Налоги, налогообложение (214)
Наука и техника (1141)
Начертательная геометрия (3)
Оккультизм и уфология (8)
Остальные рефераты (21697)
Педагогика (7850)
Политология (3801)
Право (682)
Право, юриспруденция (2881)
Предпринимательство (475)
Прикладные науки (1)
Промышленность, производство (7100)
Психология (8694)
психология, педагогика (4121)
Радиоэлектроника (443)
Реклама (952)
Религия и мифология (2967)
Риторика (23)
Сексология (748)
Социология (4876)
Статистика (95)
Страхование (107)
Строительные науки (7)
Строительство (2004)
Схемотехника (15)
Таможенная система (663)
Теория государства и права (240)
Теория организации (39)
Теплотехника (25)
Технология (624)
Товароведение (16)
Транспорт (2652)
Трудовое право (136)
Туризм (90)
Уголовное право и процесс (406)
Управление (95)
Управленческие науки (24)
Физика (3463)
Физкультура и спорт (4482)
Философия (7216)
Финансовые науки (4592)
Финансы (5386)
Фотография (3)
Химия (2244)
Хозяйственное право (23)
Цифровые устройства (29)
Экологическое право (35)
Экология (4517)
Экономика (20645)
Экономико-математическое моделирование (666)
Экономическая география (119)
Экономическая теория (2573)
Этика (889)
Юриспруденция (288)
Языковедение (148)
Языкознание, филология (1140)

Реферат: Реакции лимфоцитов на механические и осмотические воздействия при водной депривации

Название: Реакции лимфоцитов на механические и осмотические воздействия при водной депривации
Раздел: Рефераты по медицине
Тип: реферат Добавлен 22:49:31 17 октября 2005 Похожие работы
Просмотров: 43 Комментариев: 2 Оценило: 0 человек Средний балл: 0 Оценка: неизвестно     Скачать

М.З.Федорова, В.Н. Левин

Критериями, характеризующими состояние белых клеток крови являются показатели их функциональной активности и сопротивляемости различным факторам. Причем, последнее свойство часто бывает более информативным показателем, т.к. угнетение функций может происходить при далеко зашедшей деструкции клеток, имеющей необратимый характер [ 1] . Особенно важное значение это положение имеет при анализе механизмов адаптации организма к экстремальным факторам среды.

Целью проведенного исследования было изучение реакций лейкоцитов на механические и осмотические воздействия в условиях дегидратации организма.

МЕТОДИКА

Опыты проведены на 48 беспородных белых крысах-самцах массой 370-420 г. Животных экспериментальных групп лишали воды при свободном доступе к сухому корму [ 4] . Оценку осмотической стойкости, осморегуляторных и деформационных реакций вели на 3, 6 и 10 сутки безводного содержания. Контролем служили интактные животные.

Для исследований использовали суспензию лейкоцитов в изотоническом забуференном растворе (раствор Дюльбекко), состоящую на 95-98% из лимфоцитов. Осмотическую стойкость, регуляторные возможности и мембранный резерв изучали, используя комплексный метод, подробно описанный ранее [ 6] . Суть метода сводится к следующему. Лейкоциты помещали в растворы хлорида натрия разной концентрации (0,9%; 0,45%; 0,2%). Время экспозиции в гипотонических растворах составляло 60 с и 1 ч. Данные по изменению морфометрических параметров клеток после инкубации в 0,45% растворе использовали для оценки регуляторных возможностей. Мембранный резерв определяли по изменениям площади поверхности лейкоцитов после 60-секундной инкубации в 0,2% растворе хлорида натрия. Расчеты объема и площади поверхности по стандартным формулам для шаровидных тел вели на основе измерения диаметра 50-60 клеток, фиксированных глутаровым альдегидом, помещенных на предметное стекло и окрашенных азур-эозином. Осмотичскую стойкость выражали числом (%) клеток сохранившихся после часовой экспозиции в 0,2% растворе хлорида натрия.

Для оценки деформационных свойств за основу была взята методика Tran-Son-Tay R. с соавт. [ 7] . Капилляры, диаметром 4 мкм заполняли изоосмотическим буфером и соединяли с манометром. Перемещение клеток к капилляру и в капилляре обеспечивалось постоянным во всех опытах отрицательным давлением (100 мм рт. ст.). Все манипуляции проводили в микрокапилляре на предметном столике микроскопа. Для наблюдений и замеров использовали объектив 40 ВИ и окуляр-микрометр МОВ-1-15* . После регистрации для каждой клетки первичных параметров (диаметр лейкоцитов в исходном состоянии, длина и ширина деформированной клетки, время восстановления до исходной формы) рассчитывали площадь поверхности и объем покоящихся и деформированных лейкоцитов. Для каждого животного было обсчитано 40-60 клеток.

Все полученные данные обработаны статистически. Достоверность различий опрделялась по критерию t Стьюдента.

Результаты исследования

Проведенное исследование показало, что к 3-м суткам дегидратации происходило существенное уменьшение размеров лейкоцитов крови. В дальнейшем (6-10 сутки) за счет включения регуляторных механизмов клеточный объем восстанавливался до уровня интактных животных (табл. 1).

Умеренная гипоосмотическая нагрузка (60 с в 0,45% растворе хлорида натрия) приводила к достоверному увеличению объема лимфоцитов у контрольных животных, а также на 6 и 10-е сутки безводного содержания (18¸ 32%, р< 0,01). На 3 сутки дегидратации объемные изменения были незначительны (12%, р > 0,05). Высокий осмотический градиент (60 с в 0,2% растворе хлорида натрия) вызывал достоверное увеличение размеров клеток у всех животных (табл. 1). Однако, в контрольной группе изменения объема лимфоцитов были значительно больше, чем в экспериментальных (54% против 19¸ 32%, р< 0,01). Увеличение площади поверхности в этих условиях составляло: контрольная группа - 33%, 3 сутки дегидратации - 12%, 6 и 10 сутки - 20%. Т.е. мембранный резерв эффективнее использовался лейкоцитами интактных животных.

Таблица 1

Размеры лимфоцитов, инкубированных в растворах хлорида натрия разной осмолярности

Концентрация раствора, время инкубации
Группа 0,9% 0,45%, 60 с 0,45%, 1 ч 0,2%, 60 с
Контроль

5,2± 0,05

(74)

5,7± 0,07°

(97)

5,3± 0,07

(78)

6,0± 0,1°

(113)

3 сутки

дегидратации

5,0± 0,06*

(65)

5,2± 0,1*

(74)

4,9± 0,05*

(62)

5,3± 0,07* °

(78)

6 сутки

дегидратации

5,3± 0,07

(78)

5,6± 0,07°

(92)

5,3± 0,06

(78)

5,8± 0,06°

(102)

10 сутки

дегидратации

5,2± 0,06

(74)

5,5± 0,06* °

(87)

5,2± 0,08

(74)

5,7± 0,07* °

(97)

Примечание. В таблице представлены значения диаметра клеток (мкм). В скобках - объем лейкоцитов (мкм3). Звездочкой обозначена достоверность различий по сравнению с параметрами клеток контрольных животных (р< 0.05), кружочком - достоверность внутригрупповых различий с клетками, инкубированными в изотоническом растворе (р< 0.05).

Кинетика объема клеток при увеличении времени инкубации в 0,45% растворе хлорида натрия до 1 ч была примерно одинаковой у животных всех групп (табл. 1). Диаметр лимфоцитов уменьшался на 8,4% (р< 0,01) у интактных животных и 6,0¸ 6,5% (р< 0,01) у животных экспериментальных групп. Реакции регуляторного уменьшения объема приводили к восстановлению исходных параметров клеток.

Динамика осмотической стойкости лимфоцитов на разных стадиях обезвоживания организма отличалась от фазных изменений объема. С увеличением сроков водной депривации осмотическая стойкость лейкоцитов возрастала, достигая достоверных различий по сравнению с контролем к 10 суткам (контроль - 70± 7%; 3 сутки дегидратации- 69± 5,5%; 6 сутки - 76± 5,9%; 10 сутки - 95± 2,2%).

Изучение деформационных реакций лейкоцитов проводилось на живых клетках, помещеных в изотоничную среду. Несмотря на то, что глутаровый альдегид считается фиксатором, сохраняющим прижизненное состояние клетки [ 3] , морфометрические показатели, замеренные для оценки осморегуляторных реакций оказались ниже, чем полученные в данных опытах. Значение диаметра лимфоцитов до деформации были 7,0-7,5 мкм. Различия результатов измерений возможно вызваны влиянием иммерсионной среды (солевой раствор) и материалом микрокамеры при изучении деформабельности, либо глутарового альдегида при оценке объемных изменений в гипотонических растворах. Несмотря на имеющиеся различия абсолютных значений первичных параметров, динамика их изменений позволяет оценить сопротивляемость лейкоцитов механическим воздействиям и сопоставить с данными по осморегуляции.

Таблица 2

Деформационные изменения и время восстановления исходной формы лейкоцитов на разных стадиях обезвоживания организма

Группа

Р1

мкм2

Р2

мкм2

V1

мкм3

V2

мкм3

Т

с

Контроль 172± 5,6 232± 10,9° 224± 11,7 222± 11,5 70± 3,9

3 сутки

дегидратации

165± 5,3 220± 10,3° 211± 10,8 210± 10,7 71± 4,5

6 сутки

дегидратации

162± 4,2 217± 8,3° 202± 8,4 200± 8,3 92± 4,1*

10 сутки

дегидратации

165± 4,3 217± 8,6° 207± 9,2 204± 8,9 94± 3,7*

Примечание. Р1 - исходная площадь поверхности клеток; Р2 - площадь поверхности деформированных клеток; V1 -исходный объем клеток; V2 - объем деформированных клеток; Т - время восстановления исходной формы лейкоцитов. Звездочкой обозначена достоверность различий по сравнению с контрольной группой (р< 0,01); кружочком - внутригрупповые различия по сравнению с исходными показателями (р< 0,01).

Деформация клеток при прохождении через микрокапилляр за счет приложения внешних сил осуществлялась при постоянном объеме и увеличении площади поверхности (табл. 2). Используемый при этом "мембранный резерв" был фактически одинаковым у животных всех групп и составлял 32-35%. Отмеченного выше уменьшения объема циркулирующих клеток на 3 сутки дегидратации этой методикой не выявлено. Важным показателем, позволяющим судить о функциональном состоянии клеток является время восстановления исходной формы после деформации. Динамика этой характеристики отражена в табл. 2. Сравнительная оценка использования "мембранного резерва" при деформации лейкоцитов и при набухании в средах с низкой осмолярностью показала, что в контрольной группе он используется примерно в том же "количестве" (35% и 33%). У животных экспериментальных групп превращение клеток из сферических в цилиндрические идет за счет такого же "резерва" мембраны, что и у интактных животных, а объемные изменения в гипотонических растворах выражены значительно слабее.

Обсуждение результатов

Анализ полученных данных позволил установить, что при воздействии на лейкоциты интактных животных осмотических и механических факторов включаются ауторегуляторные механизмы. Они обусловливают эффективное использование пластичных свойств цитоплазматической мембраны, других клеточных структур и быстрое восстановление геометрической формы. Последнее имеет важное функциональное значение, т.к. клеточный объем выполняет роль вторичного посредника в регуляции относительной эффективности анаболизма и катаболизма [ 5] . Водная депривация уже на первом этапе (3 сутки) ведет к ослаблению реактивности изученной клеточной системы, о чем свидетельствуют меньшие изменения объема в гипотонических средах. Длительное безводное содержание животных сопровождается дезинтеграцией механизмов клеточной ауторегуляции. При одинаковых с интактными животными исходных параметрах клетки и динамике объемных изменений, выраженность последних значительно ниже. Параллельно возрастает осмотическая стойкость и время восстановления до исходной формы после деформации. Объяснением этих фактов могут служить данные об индукции в клетке синтеза белков, увеличивающих устойчивость к различным факторам. При этом повышается вязкость цитоплазмы вплоть до ее желатинизации. В основе гелеобразования лежит полимеризация актина и образование трехмерной сети [ 1,2] . Желатинизация цитоплазмы является паранекротическим сдвигом, но на обратимых стадиях повреждения физиологические функции остаются на высоком уровне [ 1] .

Список литературы

[ 1] Александров В.Я. Реактивность клеток и белки. Наука. Л. 1985.

[ 2] Браун А.Д., Моженок Т.П. Неспецифический адаптационный синдром клеточной системы. Наука. Л. 1987.

[ 3] Дуглас С.Д., Куи П.Г. Исследование фагоцитоза в клинической практике. Медицина. М. 1983.

[ 4] Куприянов В.В., Магомедов М.А., Тихомиров А.Н. Состояние микроциркуляторного русла брыжейки при экспериментальной дегидратации. Арх. анат. 77 (8): 5-13. 1979.

[ 5] Орлов С.Н., Новиков К.Н. Регуляция объема клеток: механизмы, сопряженные клеточные реакции и патофизиологическое значение. Физиол. журн. им. И.М.Сеченова. 82 (8-9): 1-15. 1996.

[ 6] Федорова М.З., Левин В.Н. Метод комплексного исследования геометрии, площади поверхности, резервных возможностей мембраны и осморегуляции лейкоцитов крови. Клинич. лабор. диагн. (11): 44-46. 1997.

[ 7] Tran-Son-Tay R., Needham D., Yeung A., Hochmuth R.M. Time-dependent recovery of passive neutrophils after large deformation. Biophys. J. Biophisical Society. 60: 856-866. 1991.

Оценить/Добавить комментарий
Имя
Оценка
Комментарии:
Где скачать еще рефератов? Здесь: letsdoit777.blogspot.com
Евгений21:33:20 18 марта 2016
Кто еще хочет зарабатывать от 9000 рублей в день "Чистых Денег"? Узнайте как: business1777.blogspot.com ! Cпециально для студентов!
14:44:15 24 ноября 2015

Работы, похожие на Реферат: Реакции лимфоцитов на механические и осмотические воздействия при водной депривации

Назад
Меню
Главная
Рефераты
Благодарности
Опрос
Станете ли вы заказывать работу за деньги, если не найдете ее в Интернете?

Да, в любом случае.
Да, но только в случае крайней необходимости.
Возможно, в зависимости от цены.
Нет, напишу его сам.
Нет, забью.



Результаты(151201)
Комментарии (1843)
Copyright © 2005-2016 BestReferat.ru bestreferat@mail.ru       реклама на сайте

Рейтинг@Mail.ru